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染色液的浓度如何测定
发布时间:2019-04-24   点击次数:202次

       染色液主要用途:哺乳动物脑组织的缺血梗塞染色,测定脑梗死灶体积
染色液浓度的测定
A、用肉眼比较见车染料浓度:
将一用于对照的标准液与另一用过的染色液按相同比例稀释后,用肉眼检查法给予鉴定,再用两种溶液之体积计算出染色液之浓度差别。
B、分光光度法测定染料浓度:使用分光光度计。
将染色液之样液稀释后测定其吸光值,再取具有指定标准染料浓度之对照液以同样比例稀释后测定其吸光值,然后比较这两个吸光值,再计算出生产用之染色液的实际染料浓度。
染料浓度计算方法(克/公升)=吸光值*染料系数*稀释倍数
C、 定期部分更新染色液以调整染色力的方法:
定期的部分更新染色液也可以延长染色液的使用寿命,做法是在一定间隔的时间后将一定量的槽液排放掉,并换入新液,计算新液时应包括流出时带走的染料量,这样便定期的消除了部分杂质,染色液可以在较长时间内保持稳定生产均匀的著色膜。
染色液的原理:
    2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)是脂溶性光敏感复合物,常用于检测种子的生存能力以及检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,能与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色。
    正常脑组织和有活力种子胚组织活细胞中的脱氢酶可以将 TTC 还原成不溶性的红色稳定的三苯基甲臢(TTF),如果脑组织细胞或胚种细胞死亡或生活力衰退,则不能染色或染色较浅。

 

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